色谱柱维护保养小秘诀
HPLC(液相色谱)是实验室重要的 “分离”手段,而色谱柱则堪称分离的心脏。日常使用HPLC不免会遇到由色谱柱引起的各种故障,因此提前做好维护保养色谱柱的工作十分重要。
一、试验样品需过滤
若试验样品中的不溶物进入色谱柱,则会引起入口过滤器及填料堵塞,柱压上升,从而破坏分离,因此样品应尽可能以清洁的状态注入。不论在什么情况下,建议用0.5µm左右的过滤器过滤一下样品。
二、谨防色谱柱污染
有时样品经过过滤,仍会发生色谱柱堵塞、污染等情况,这可能是由于样品中存在的夹杂物使溶解性差的成分向流动相析离、被填料牢固保持的夹杂成分的吸附、微型注射器污染等原因引起的。所以在分析前使用过滤器和防护柱,将这些污染尽可能地除去,过滤器中通常装有孔径为 1µm 左右的滤网,可有效除去引起堵塞的物质;防护柱是安装在分析柱前面的短柱,起到捕捉牢固吸附于填料上夹杂成分的作用。
三、保证色谱柱洁净
上面提到的防护柱其清除污染的作用有限,因此色谱柱在使用之后,当根据样品的不同,在每数次分析样品之后进行一次清洗。
四、色谱柱轻拿轻放
色谱柱中填满了数微米大小的细小粒子,应避免冲击和外部压力的急剧变化,防止损伤柱子。
五、确认流动相的制约
有时色谱柱会因流动相的pH、有机溶剂量等受到制约,因此需充分确认之后再使用。
六、按需要使用不同的色谱柱
若一支色谱柱用于各种分析,则前面的测试数据有时不会重现。此外,如果重复进行流动相条件差别较大的分析,也会加速色谱柱的劣化。因此请务必做好各个色谱柱的使用记录。
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