如何避免液相色谱损坏

在高效液相色谱的使用中，我们会发现很多实验室会面临色谱柱频繁损坏的问题。
除了要掌握色谱柱的清洗和再生外，其实重要的事情还是要注意如何去避免色谱柱的损坏。所以，这节课我们就来讨论一下色谱柱的预防吧。
损坏的来源
首先，需要来了解一下色谱柱的损坏来源于哪些方面：
泵头密封圈的磨损
进样阀转子密封圈的磨损
析出的缓冲盐
样品中的复杂易吸附基质
其实，在工作过程中大多数的颗粒物堵塞导致的色谱柱背压升高问题是体现在柱头堵塞。
而样品的易吸附机制也可能会和柱前端的硅胶表面游离的硅醇基发生作用导致色谱柱背压升高。
但是这种情况在较低的PH系统中会有所改善，因为较低的PH系统会降低硅胶表面的硅醇基发生解离。
预防措施
为了降低色谱柱的损伤问题，我建议大家在使用色谱柱时可以做一些预防。例如：
1在液相系统中加入在线过滤器
在线过滤器的内部颗粒空隙一般是0.5微米，对于UHPLC会选择0.2微米空隙的在线过滤器。这个空隙尺寸和柱头的过滤筛板尺寸接近或者略小。
不同公司的在线过滤器
所以，在线过滤器能够有效的阻隔来自样品、泵头密封垫、自动进样器的转子密封垫的颗粒物，以防止柱头过滤筛板的堵塞。
注意：但是对于非常低死体积的液相系统，在线过滤器的加入可能会导致系统死体积增大峰展宽变严重的问题。而对于大多数的液相系统而言，色谱图不会有太大变化。
2在柱子前端使用保护柱
保护柱有很多种，通用型、一体式、卡套式，但是它其实是一个和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。因为它具有和分析柱相同的内部填料，所以保护柱不仅可以阻隔颗粒物，还可以阻隔易吸附的样品基质组分。
不同公司的保护柱
注意：由于保护柱中可能有大量的强保留组分，在用强溶剂清洗系统时请取下保护柱，以防止这些强保留组分被洗脱进分析柱。保护柱如果出现吸附饱和也可能会对分离效果有影响，例如图中所示：3对样品进行净化处理
有一些液相的分析方法没有明确标注样品的净化，但我希望大家在做分析时都能够考虑样品的净化，常用的方案是对样品进行过滤。
色谱柱的储存
在实际工作中，色谱柱的储存也会影响柱子的使用寿命。那么对于色谱柱的储存，也有以下建议：
短期储存时
应该保存在常用的流动相条件下。并且，一定要移除系统中的缓冲盐、酸等。
长期储存时
将色谱柱按照说明书的要求保存在对应的溶剂中，并且将色谱柱从系统中取下两头用堵头堵死。
希望今天的文章，能够对大家在色谱柱使用时延长柱寿命有所帮助！