色谱柱的预防
影响色谱柱运用的要素
不同基质的填料具有不同的pH适用范围。其实,在作业过程中大多数的颗粒物堵塞导致的色谱柱背压升高问题是体现在柱头堵塞。当活动相pH超出碱性范围时,会加速硅胶的溶解而释放出絮状物堵塞柱子;当活动相pH值超出酸性范围时,键合相易发生水解而流失,这两种反应均是不行逆反应,特别是在温度较高(>40℃)的环境下,会使柱效敏捷下降而报废。
当前运用为广泛的是硅基键合相填料,当以水溶液作为活动相或活动相中含有一定浓度的磷酸盐缓冲液时,水溶液中或缓冲盐溶液中会滋生出一些细菌或霉菌,从而堵塞固定相颗粒间的空地。特别是关于多元自动份额混合的液相色谱仪来说,水相或缓冲盐相独立存贮,因寄存时刻较长而简略发生此类问题。
现在,广泛运用的填料颗粒粒径范围在3~10μm,孔径在6~10nm,色谱柱在运用中会有大量的活动相经过,如活动相含有微量不溶性杂质颗粒,则很简略在柱头部位被截留,久而久之,形成色谱柱机械性堵塞,引起柱压升高而无法正常运用。
影响色谱柱寿命的要素许多,除活动相和样品要素外,还有其它一些外在要素,如,柱压的影响,温度的影响,色谱柱的正确冲刷,色谱柱的正确装置等。
防备措施
为了下降色谱柱的损害问题,大家在运用色谱柱时能够做一些防备。例如:
在线过滤器的内部颗粒空地一般是0.5微米,关于UHPLC会挑选0.2微米空地的在线过滤器。这个空地尺度和柱头的过滤筛板尺度挨近或许略小。
维护柱有许多种,通用型、一体式、卡套式,可是它其实是一个和剖析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。
有一些液相的剖析方法没有明确标注样品的净化,但期望大家在做剖析时都能够考虑样品的净化,常用的方案是对样品进行过滤。
保存
1、短期保存
2、长期保存
将色谱柱按照说明书保存在对应的溶剂中,而且将色谱柱从体系中去下,两端用堵头密封。
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