色谱柱的使用注意事项

1.缓冲液的盐浓度必须小于 500 mM。
2.建议使用保护柱。不能使用强碱性物质作为流动相添加剂或者溶解样品，因为这样会损坏填料中的硅胶成分。
3.流动相pH>7.0时，温度必须在5°C到25°C之间。
4.不能使用pH>8.0的磷酸缓冲液。当需要使用pH >9.0的缓冲液时，使用硼酸缓冲液。
5.推荐用乙腈开始分析。
  有机溶剂改性剂的洗脱能力按以下顺序递减:
  乙腈>乙醇>甲醇: 50%CHzCN # 65-70%EtOH # 75-80%MeOH
  其它有机溶剂没有做过使用研究，所以可能会对色谱柱造成损坏。
  由于乙醇的粘度比较高，所以使用乙醇时会比乙腈产生高的多的反压。
6.选择流动相配比时，推荐使用水(缓冲液) /乙腈50:50 (v/v)作为初始流动相。
  如果样品保留时间太短或者太长，可以降低或者提高乙腈的含量。
  乙腈含量的微小变化可能会造成样品保留时间的明显变化。
  流动相在使用前需要用0.5um滤膜过滤，以清除固体颗粒。
  降低温度可能会改善选择性。
  升高温度同时降低流速可能会提高分辨率。
7.流动相中有机溶剂的含量过高会导致流动相中盐份析出，导致色谱柱堵塞。