柱后衍生设备的故障检修
l全面检查系统, 处理漏液问题。
l对设置参数、缓冲液、试剂、阀等根据说明进行核实。
l 系统是否有改变
l根据文献条件对比:标准样品、色谱柱、参数日志是否有变化。
l收集信息: 观察信息、手册、书、技术支持。
l得出关于问题原因的结论
l开始工作
l在改变梯度、温度或其它操作条件之前, 针对同一问题至少连续得到两张色谱图。 改变之后, 至少有两张色谱图显示了同样的改变效果。 尤其是在优化梯度条件的时候。
现象 | 原因 | 解决方法 | 注意事项 |
试剂压力低 | 1 试剂泵中存在气泡 2 试剂流速低 3 接头漏液 | 1 检查气泡 2 检查泄漏 3 检查泵密封圈的完整性 | 将漏液的接头拧紧 |
试剂压力高 | 1 沉淀物堵塞流路 2 接头拧的过紧 3 检测器流通池的堵塞 4 背压调节器故障 | 首先, 确定堵塞的精确位置。 接 下来一次断开一个位置, 从背压 调节器端向前直到压力下降。 | A:部分堵塞,清洗管路。 B:*堵塞,更换配件。 |
试剂泵不工作或 流速错误 | 1 检测泵的设置 2 检查试剂增压 3 检查泵的密封圈是否泄漏 4 清洗止回阀 | ||
过压泻放阀打开 | 系统有堵塞 | 首先, 确定堵塞的精确位置。 接 下来一次断开一个位置, 从背压 调节器端向前直到压力下降。 | 冲洗系统直到压力降低,或更换适当组件。 |
常见色谱问题
现象 | 原因 | 解决方法 | 注意事项 |
背景信号高 | 1 洗提液污染 2 细菌生长 3 试剂污染 4 化学品不纯 5 指印 | 清洗所有的试剂瓶并冲洗管线 | 柱后衍生反应对轻微的污染都很敏感 |
基线噪音 | 1 旧的泵密封 2 止回阀故障 3 检测器噪音 4 化学品污染 5 试剂过期 | 1 检查噪音的样式 2 如果背景信号也提高, 检查化学品是否污染或者是否后配置错误。 | 检查噪音的频率是否与泵的频率一致。 如果噪音是随机的, 检查检测器。 |
峰减小或消失 | 1 不恰当的试剂配制 2 未与水解试剂反应 3 反应器温度设置错误 4 试剂流速设置错误 5 流通池污染 6 自动进样器污染 7 样品污染 8 色谱柱被金属离子污染 9 样品制备问题与系统腐 蚀 10 TRIONE®或 OPA 氧化 11 试剂泵未校正。 12 色谱柱铁离子污染 | 1 制备新鲜的试剂 2 重新配制标准品 3 用荧光检测器检测 4 更换进样器的转子密封 5用 Li220或 Na220 清洗氨基酸柱 6 检查反应器温度 7 检查试剂的氧化 8 清洗流通池 9 清除铁污染 10 除去试剂瓶中的不锈 钢筛板。 11 清洁或更换被腐蚀的组件。 | 除了 1-萘酚、 胺甲萘所有的 峰都消失= OPA过期 除了 1-萘酚所有的峰都消失 =水解试剂 峰大小变化=流通池、自动 进样器污染或样品降解。 所有峰消失=流通池、自动 进样器污染或样品降解。 样品储存问题 检测器设置 铁污染可能来自样品、柱寸 时间过长、洗提瓶中的不绣 钢筛板和系统的腐蚀。 |
保留时间不 稳定 | 1 平衡时间短 2 内体积太大 3 HPLC 比例阀泄漏 4 自动进样器故障 | 1 以每次 2 分钟增加平衡时间 2 重连系统, 按氨基酸安 装部分 | |
假峰 | 1 洗提液试剂瓶的污染 2 喷射线或过滤器的腐蚀 3 挥发性胺 | 1 更换洗提液 2 用肥皂和水清洗时间瓶 3 去掉喷射线或过滤器 4 清除在氨基酸合成时使 用的试剂 | |
一 段 时 间 后基线飘移 | 1 污染物的生长 2 室温的变化 | 1 冲洗色谱柱 2 控制室内温度 |
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