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制备色谱仪的相关介绍
2022年06月30日 08:56
来源：上海同田生物技术股份有限公司
高速逆流色谱是一种连续高效的液—液分配色谱分离技术， 它不用任何固态的支撑物或载体。 它利用两相溶剂体系在高速旋转的螺旋管内建立起一种**的单向性流体动力学平衡，当其中一相作为固定相，另一相作为流动相，在连续洗脱的过程中能保留大量固定相。
由于不需要固体支撑体，物质的分离依据其在两相中分配系数的不同而实现，因而避免了因不可逆吸附而引起的样品损失、失活、变性等，不仅使样品能够全部回收，回收的样品更能反映其本来的特性，适合于天然生物活性成分的分离。而且由于被分离物质与液态固定相之间能够充分接触，使得样品的制备量大大提高，是一种理想的制备分离手段。
它相对于传统的固—液柱色谱技术，具有适用范围广、操作灵活、高效、快速、制备量大、费用低等优点。HSCCC 技术正在发展成为一种备受关注的新型分离纯化技术，已经广泛应用于生物医药、天然产物、食品和化妆品等领域， 在天然产物行业中已被认为是一种有效的分离技术；适合于中小分子类物质的分离纯化。
制备色谱仪比较常用的是制备薄层板色谱、制备离心薄层色谱、制备干柱薄层色谱三个类别。
1、 制备薄层板色谱
制备板：一般使用200X200mm的薄层色谱板，吸附剂厚度为0.5~1mm，一般不超过2m，平均1mm厚需要的硅胶量为15~20g。为了得到低成本、铺层均匀的高质量制备薄层板，建议使用上海科哲公司的TD-II型全自动制备薄层铺板机。
点样：制备薄层分离的样品量大，一般采用条带点样、不使用圆点点样；一般1mm厚的硅胶*大约100mg，样品浓度不宜太稀，应在2~10%为宜。为了得到均匀而规则的点样结果，建议使用上海科哲公司的SP-3型电动薄层条带点样器。同时展开剂的用量比较大，点样位置要比较高
展开：薄层色谱层析缸要充分饱和，如制备板数量较多，请选用上海科哲公司的制备薄层板架；
显色：一般使用紫外灯或碘蒸汽等非破坏方式显色，或在板边缘进行化学试剂显色；
回收：将检测到的样品连同硅胶一齐刮下，防入砂芯漏斗，使用适当溶剂将组分洗脱，将洗脱溶剂蒸干即可。一般希望洗脱溶剂沸点较低，不与组分发生反应。
制备薄层板色谱优点是使用方便、便宜、节省人力，缺点是分离时间较长。
2、 制备离心薄层色谱
与普通制备板有三个不同点：
首先：色谱板是圆的，是径向色谱，分离能力优于方板；
其次：洗脱液的流动不靠毛细现象，靠离心力，减少了分离时间与脱尾，分离效能很高；
后：洗脱液是连续流动的，可以非常容易的形成梯度，并且不需要刮下吸附层，这样可以使色谱板可以反复使用；
所以，制备离心薄层色谱的分离效能与分离速度要远高于制备薄层板色谱，建议采用上海公司科哲公司的KH-CTLC型制备离心薄层色谱仪。
3、制备干柱薄层色谱
可以看作棒状的薄层色谱，优点是简单易行，快速经济、制备量大。缺点是必须使用可透紫外的管材，而且在收集样品时要割断管材，使费用略高。上海科哲公司提供专用的薄层色谱柱。本方法与真空系统联用，构成减压真空色谱，性能会得到进一步提升。
关键词：
高速逆流色谱系统
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