液相色谱基线异常的其中四种原因

一、导致高基线和变化基线的流动相杂质：

        杂质在流动相中高度溶解的特定情况下，它们不会被色谱柱截留，并有助于在整个色谱图中产生高于正常的检测器信号。使用梯度洗脱时，如果杂质仅存在于梯度中使用的一种溶剂中，则检测器信号可能会缓慢变化并且与在任何时间点对流动相有贡献的溶剂比例有关。

        流动相杂质不会表现为看起来像典型色谱峰的信号特征，因此它们不会直接与分析物峰本身发生冲突。但是如果杂质的物理化学性质与分离中的目标分析物相似，则杂质可以表现为基线中看起来像典型峰的特征。有时这些被称为“鬼峰”，因为即使没有样品注入，它们也会持续存在于基线中。

二、检测器对主要流动相组分的响应：

        有时候用于 LC 方法的溶剂制备中的微小变化会对基线的外观产生巨大影响。这种效应的一个典型例子是从磷酸盐缓冲流动相变为使用甲酸作为添加剂的流动相。尽管磷酸盐物质对低至约 200 nm 的紫外光具有高度透明性，但羧酸盐物质（如甲酸盐、乙酸盐）比约 230 nm 以下的磷酸盐吸收更多。当使用梯度洗脱时，很容易观察到这种差异，并且添加剂仅存在于流动相梯度中使用的一种溶剂中（例如，大部分水性溶剂）。

三、由于泵问题导致流动相组成不一致：

         粘性止回阀和滞留气泡是高压泵头流量不一致的常见原因，当二元泵系统中的两个泵中的一个发生故障时，可能会导致通过 HPLC 色谱柱并最终到达检测器的流动相成分发生变化。如果使用中的检测器对这些成分变化很敏感，那么异常检测器基线可能是真正由泵引起的问题的征兆。举个例子， A 溶剂含有乙酸铵，B 溶剂是乙腈，并且在 210 nm 处使用 UV 检测的情况。在这种情况下，A 溶剂比 B 溶剂吸收更多的光，但如果 A/B 混合物的成分随时间保持一致，则将观察到平滑、平坦的检测器基线。但是，如果来自 A 通道的流量由于止回阀问题或气泡而变得不一致，则 A/B 混合物的成分将不一致，从而导致基线中出现锯齿状图案。

四、温度影响：

        不同的检测器以不同的方式受到温度变化的影响。折射率 (RI) 检测的信号基线对温度变化非常敏感。因此，稳定检测器本身和实验室环境的温度将有助于最大限度地减少基线漂移。UV 吸光度检测器也容易发生温度变化，这会导致基线漂移，但与 RI 检测器相比，变化程度较小。与过去的旧设计相比，现代紫外线检测器设计对实验室温度变化的影响要小得多。

        面对色谱系统中的流动相存在杂质的情况，恒谱生可以为您解决这些问题，恒谱生流动相过滤头具有以下这些特性:

(1）性能稳定，抗冲击和交变负载能力优于其他金属过滤材料;

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(3）机械强度优异，无须外加骨架支撑保护，安装和使用简单，维护方便，组装性好。

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       恒谱生鬼峰捕集去除柱可以有效吸附流动相中的杂志，从而缩短了方法验证和杂质分析的时间。鬼峰捕集去除柱主要的特点是能够去除溶剂包括有机溶剂中的杂质，在反相色谱梯度分析时，将小柱安装在梯度混合器和自动进样器之间，不仅能够去除流动相中的杂质，还可以有效捕集管路和混合器中的杂质。

        今天恒谱生分享的知识先到这啦，希望对您的工作有所帮助！