维生素AD滴剂中微量VD3

2010版《中国药典》中关于维生素D的测定方法非常复杂，要求测定前维生素D和维生素D3的含量，常用第二法测定，方法中样品需要皂化、液液萃取、浓缩、反相制备色谱净化、再浓缩等一系列处理后才能进样，整个过程耗时很长且无法保证方法重现性。双三元液相色谱系统具有在线固相萃取功能，可以利用阀切换只将目标化合物从固相萃取柱转移至分析柱进行分析，起到很好的净化效果。系统配置图参见图2-11

色谱柱：分析柱Cnwsil Silica，5 µm，4.6×250mm， P/N：LAEQ-1825004605； SPE柱Acclaim HILIC-10，3 µm，3×150mm，P/N：074258；柱温：30 ℃；富集泵：流动相A：正己烷；流动相B：异丙醇；富集泵流动相条件及阀切换时间参考表2-8

分析泵：流动相A：正己烷；流动相B：正戊醇；分析泵流速：1.0 mL/min；分析泵等度：A:B=991:9（离线混合）；检测方式：紫外检测器，波长254 nm；进样量：20 µL；样品前处理方法：精密称取维生素AD胶囊中油状成分1.0 g于100 mL锥形瓶中，加乙醇30 mL、维生素C 0.2 g与50%氢氧化钾溶液3mL，置水浴上加热回流30 min，冷却后，自冷凝管顶端加水10 mL冲洗冷凝管内壁，将皂化液移至分液漏斗中，皂化瓶用水100 mL分数次洗涤，洗液并入分液漏斗中，用正己烷振摇萃取3次，合并正己烷液，用水洗涤数次，直至水层遇酚酞不再显红色，静置，分取正己烷萃取液，水浴中减压蒸干，以正己烷溶解并定容至10 mL量瓶中，作为供试品溶液，摇匀，待用。未用完溶液放入4 ℃冰箱保存。样品测定谱图见图2-12。样品经过皂化处理后，去除了大量干扰成分。前维生素D达到了基线分离，UV扫描图比较均匀，方法专属性较好。通过前处理与双三元液相色谱相结合，很好地解决了复杂基质的干扰，对待测组分达到了很好的测定。