微流控毛细管电泳答疑小课堂

Revvity的明星产品LabChip GXII Touch 毛细管电泳系统采用一个单吸管微流体芯片，可快速对96或384孔板中的蛋白质样品进行指征分析。微流体芯片技术可全自动的完成蛋白质样品的染色、脱色、电泳分离和分析。Labchip仪器的光学元件检测到激光诱导的荧光信号后，易于操作的系统软件自动分析数据，并通过Ladder和内标校正为用户提供蛋白质相对浓度、分子大小和纯度等。可立即生成虚拟胶图、电泳峰图或汇总表格式的电子数据结果以供用户查阅或报告（如图1）。

图1. LabChip GXII Touch 软件的图形化用户界面

常见问题

Q

Low marker的作用是什么？

A

用于校正、对齐。比如跑400个样品，出峰时间会有差异，必须用Low marker校正。

Q

为什么有的样品比Ladder跑得慢？

A

因为试剂中的Ladder是没有经过任何糖基化等修饰的，若样品是经过修饰的，分子量就偏大，会跑得稍慢，基于原理，这一点在任何CE技术中都一样，无法避免。

Q

蛋白芯片与核酸芯片有什么不同？

A

蛋白芯片有脱色步骤，因为蛋白变性后，样品中有大量的SDS，需要去掉没有与蛋白结合的SDS，否则背景值会很高。另外蛋白芯片不需要wash，而核酸芯片需要wash，因为蛋白芯片使用较快，能检测的样本只有400/200，经过测试发现不wash，对性能没有影响。（此处Wash指实验结束后芯片加Storage Buffer后放在设备上wash。）

Q

机器Purge的功能有什么作用？

A

Purge是施加3 min的正压来疏通管路，防止冷凝水等堵塞管路。

Q

机器是否需要每天关机？

A

若做不到每天关机，至少需要2-3天重启一下机器。

Q

上一个样品run完到下一个样品会有一个wash的过程，这一步是否能够wash干净？

A

可以一针样品一针水去测试，实际测试结果是上一个样品不会对下一个样品产生干扰。