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皖仪科技液相色谱检测食品中的6种着色剂

2024年03月19日 10:22 来源:安徽皖仪科技股份有限公司

皖仪科技液相色谱检测食品中的6种着色剂


摘要:本文参考GB 5009.35-2016标准建立了一种高效液相色谱法测定食品中6种着色剂(柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝和赤藓红)含量的分析方法。结果表明1.00-50.0μg/mL浓度范围内的线性决定系数R平方值均大于0.999,具有良好线性,符合实验要求。6种着色剂峰分离度均大于3,分离度良好。6种着色剂的保留时间重复性小于0.1%,峰面积重复性小于0.2%,测试重复性良好。该方法准确可靠、灵敏度高,满足测试需求。


前言

 

着色剂又称食品色素,是以食品着色为主要目的,使食品赋予色泽和改善食品色泽的物质。长期食用着色剂超标的产品,将危害消费者的身体健康。食品中人工合成着色剂用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取,制成水溶液,注入高效液相色谱仪,经反相色谱分离,根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。

 

1 实验方法

 

1.1 仪器配置


          表1 高效液相色谱系统配置清单


1.2 测试条件

色谱柱:C18 5μm, 4.6×250mm

柱温:35℃;

波长:254nm

流速:1.0 mL/min

进样体积:10μL

流动相:A/B=0.02mol/L乙酸铵溶液/甲醇;

洗脱方式:梯度洗脱。


              表2 梯度条件


1.3 设备及试剂、耗材

试剂:柠檬黄(CAS:1934-21-0)

日落黄(CAS:2783-94-0)

亮蓝(CAS:3844-45-9)

胭脂红(CAS:2611-82-7)

苋菜红(CAS:915-67-3)

赤藓红(CAS:16423-68-0)

甲醇:色谱纯;

乙酸铵:分析纯;

设备:超声脱气装置;

耗材:滤膜:水相针式滤器(聚醚砜)0.45μm

一次性无菌加液器:2mL 0.6*25mm1.

 

1.4 标样制备

1.4.1 着色剂混标配制

分别准确移取胭脂红,亮蓝,日落黄,苋菜红,赤藓红标准溶液各1.0mL,柠檬黄标准溶液0.5mL10mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀,经0.45μm微孔滤膜过滤。配制成质量浓度分别为胭脂红、亮蓝、日落黄、苋菜红标准溶液浓度为50.0μg/mL25.0μg/mL的柠檬黄标准溶液,10.0μg/mL的赤藓红标准溶液。置于4℃冰箱中冷藏保存。

 

1.4.2 六种着色剂混标系列校准溶液

配制胭脂红10μg/mL,亮蓝50μg/mL,日落黄25μg/mL,苋菜红25μg/mL,赤藓红25μg/mL,柠檬黄5μg/mL不同浓度的混标溶液,加水定容至1ml。逐级稀释,配制成不同浓度梯度的6种着色剂混标使用液。

 

1.4.3 六种着色剂单标标准溶液配制

分别准确移取胭脂红,亮蓝,日落黄,苋菜红,赤藓红标准溶液各1.0mL,柠檬黄标准溶液0.5mL610mL容量瓶中,分别用水定容至刻度,混匀,经0.45μm微孔滤膜过滤。配制成质量浓度分别为胭脂红、亮蓝、日落黄、苋菜红标准溶液浓度为50.0μg/mL25.0μg/mL的柠檬黄标准溶液,10.0μg/mL的赤藓红标准溶液。置于4℃冰箱中冷藏保存。

 

2 结果与讨论

 

2.1 单标定性及系统适用性

1.4.36种着色剂单标标准溶液和1.4.16种着色剂混标溶液,按照1.2的测试条件进样分析,通过单标定性确定混标中不同着色剂出峰时间,谱图如图1所示。通过混标谱图分析得到六个峰的分离度均大于3,分离度良好。




              图1 单标定性分析谱图

 

2.2 标准曲线取

1.4.26种着色剂混标系列校准溶液,按照1.2的测试条件进样分析,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,采用外标法建立工作曲线。6种着色剂标曲结果分别如图2-7所示。不同浓度曲线重叠谱图如图8所示。6种着色剂曲线的线性决定系数R平方值均大于0.999,具有良好线性关系,符合实验要求。


         图2 柠檬黄系列校准曲线线性图


          图3 苋菜红系列校准曲线线性图


          图4 胭脂红系列校准曲线线性图


          图5 日落黄系列校准曲线线性图


          图6 亮蓝系列校准曲线线性图


         图7 赤藓红系列校准曲线线性图


         图8 六种着色剂校准系列溶液重叠谱图

 

2.3 重复性

1.4.16种着色剂混标溶液重复进样6次,按照1.2的测试条件分别连续进样测定6次,重复性色谱图如图9所示,根据测试结果可得,6种着色剂的保留时间重复性小于0.1%,峰面积重复性小于0.2%,测试重复性良好说明皖仪科技LC3300系列高效液相色谱仪具有良好的精密度。

         图9 六种着色剂混标重复性叠加谱图


3 结论

 

本文使用皖仪科技LC3300系列高效液相色谱仪对食品中的着色剂进行了检测,结果表明1.00-50.0μg/mL浓度范围内的线性决定系数R平方值均大于0.999,具有良好线性,符合实验要求。6种着色剂峰分离度均大于3,分离度良好。6种着色剂的保留时间重复性小于0.1%,峰面积重复性小于0.2%,测试重复性良好。该方法准确可靠、灵敏度高,满足测试需求。


关键词: 液相色谱仪

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