Thermo 反相色谱柱 使用和维护说明
1. 适用键合相 反相色谱柱键合相包括:C18、C8、C4、C1、Phenyl、PFP、aQ 等。
2. 柱体积 色谱柱的柱体积可以通过以下公式估算: V=0.68 π (d/2)2 L·10-3 V 为色谱柱柱体积(mL),d 为色谱柱内径(mm),L 为色谱 柱长度(mm)。
3. 色谱柱柱效测试与保存 反相色谱柱出厂时都经过柱效测试,所用化合物为茶碱、邻二 甲苯、对硝基苯胺、苯甲酸甲酯和二甲苯,如有不同,以柱效 报告为准。 在条件允许情况下,请对新色谱柱进行柱效测试。 反相色谱柱出厂的保存溶剂详见柱盒或 COA 报告。
4. 温度 所有硅胶基质色谱柱使用温度应低于 60℃。
5、 样品制备 最好将样品溶解在流动相或极性相近的溶剂中。如果使用梯度 洗脱,则需要将样品溶解在初始流动相或极性相近的溶剂中。 样品溶液不应含有任何颗粒物,最好使用 0.45 μm 或更小孔径 的滤膜过滤。同时建议在删除空格色谱系统中使用在线过滤器。 样品溶液如果使用强洗脱溶剂(例如,流动相为水,样品溶剂 为甲醇),为达到较好峰形,需要降低进样量(以 250×4.6 mm 规格为例,小于 10 μL)。
6、 流动相 所有流动相,特别是含有缓冲盐的流动相,最好实验当天配制; 如果使用了早前配制的流动相,请确保流动相 pH 值是否变化, 并确保流动相没有发霉长菌。 流动相的 pH 值取决于您的应用和色谱柱填料类型。此说明书 上所列的所有的色谱柱上都建议使用 pH 范围为 2~8 之间的流 动相,如果需要使用 pH 更高(1.5-10)的流动相的硅胶柱, 请选用 Acclaim PolarAdvantage II (PA2)、Acclaim AMG C18、 Accucore Polar Premium 等色谱柱,具体使用情况请咨询工程 师或者参考该柱子的说明书。 如实验方法中使用高比例的水(>95%)作为流动相条件,强烈 建议使用耐水键合相,例如 Accucore aQ、Hypersil GOLD aQ、 Aquasil C18、Syncronis aQ 等色谱柱,保证重现性。 所有流动相都需使用 0.22 μm 滤膜过滤。
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