液相色谱法测定酒中的苯甲酸、山梨酸和糖精钠的含量

“吨吨吨吨......”喝一杯之前要注意它的含量！

前言

酒的背后，可谓一门博大精深的学问，其中蕴含着丰富的文化和历史，也有许多令人惊叹的知识点，不同的酒也有着不同的意义和作用。白酒是中国特有的酒类，以高粱等粮食为原料，经过多道工序酿制而成，不仅口味独特，还带有浓烈的香气，在中国常常作为社交和聚会的重要元素。葡萄酒则是以葡萄为原料，经过发酵和陈酿而得，常常带有果香和橡木香，在西方，葡萄酒则被视为高雅的享受。而黄酒则是烹饪中不可缺少的调味品之一 ，它具有浓郁的香气，甘甜味美，风味醇厚，并含有氨基酸、糖、醋、有机酸和多种维生素等营养物质。

但是，这些酒在发酵生产的过程中，通过植物或微生物体内代谢可能生成一些添加剂，也可能是食品原料自身存在，或者是在酒加工的过程中会使用到一些添加剂。为了人体健康，我们需要根据标准对酒中的添加剂进行含量检测。本篇介绍的是皖仪科技高效液相色谱对酒中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的检测。

2、仪器配置及实验方法

2.1 仪器配置

LC3200系列高效液相色谱仪

表1 皖仪液相配置清单表

2.2 实验方法

2.2.1 试剂配制

表2 试剂清单

2.2.1.1 乙酸铵溶液

取1.54g乙酸铵，加入适量水溶解，用水定容至1000mL，经0.22μm水相微孔滤膜过滤后备用。

2.2.1.2 苯甲酸、山梨酸和糖精钠混合标准系列工作曲线取苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准溶液（购买的标准品，浓度为1000mg/L）适量，配制成质量浓度分别为0mg/L，1.00 mg/L，5.00 mg/L，10.0 mg/L，20.0 mg/L，50.0 mg/L，100 mg/L和200 mg/L的混合标准系列工作溶液。

2.2.2 色谱条件

表3 色谱条件

2.2.3 实验前处理

准确称取约2g(精确到0.001g)试样与50mL具塞离心管中，加水约25mL，涡旋混匀，与50℃水浴超声20min，冷却至室温后于8000r/min离心5min，将水相转移至50mL容量瓶中，在残渣中加水20mL，涡旋超声5min，于8000r/min离心5min，将水相转移至同一50mL容量瓶中，并用水定容至刻度，混匀。取适量上清液过0.22μm滤膜，待液相色谱测定。

3、实验结果

3.1 系统适用性

图1 200mg/L混标测试谱图

表4 200mg/L混标测试数据

说明：由谱图和表格数据可知，苯甲酸、山梨酸和糖精钠峰型均良好，目标峰周围无杂峰，理论塔板数高，分离度均大于1.5，满足实验要求。

3.2 标准曲线

图2 苯甲酸标准曲线测试结果

图3 山梨酸标准曲线测试结果

图4 糖精钠标准曲线测试结果

说明：由以上谱图可知，苯甲酸、山梨酸和糖精钠曲线相关系数R值分别为0.9999、1.000、0.9999，均在0.9999以上，满足实验要求。

3.3 重复性

  图5 20mg/L混标6针重复性测试谱图

表5 20mg/L混标6针保留时间重复性测试数据

表6 20mg/L混标6针峰面积重复性测试数据

说明：根据以上表格数据可知，苯甲酸、山梨酸和糖精钠保留时间重复性RSD分别为0.086%、0.083%、0.1%。重复性好。峰面积重复性RSD分别为0.438%、0.426%、0.408%，重复性较好。均满足实验要求。

3.4 检出限

图6 1mg/L混标测试谱图

表7 1mg/L混标测试数据

说明：根据上表数据，3倍信噪比为检出限计算可知，苯甲酸、山梨酸和糖精钠检出限分别为0.012mg/L，0.011mg/L，0.026mg/L。满足实验要求。

3.5 某品牌白酒、某品牌葡萄酒和某品牌黄酒测试结果

图7 某品牌白酒测试谱图

图8 某品牌葡萄酒测试谱图

图9 某品牌黄酒测试谱图

表8 某品牌白酒、葡萄酒和黄酒测试结果

说明：根据上表数据和标准GB 5009.28-2016的分析结果的表述中公式计算可知。某品牌白酒苯甲酸计算结果为0.00048g/kg，糖精钠为0.00935g/kg。满足GB 2760-2024中苯甲酸的最大使用量0.4g/kg，糖精钠最大使用量0.15g/kg。某品牌葡萄酒苯甲酸计算结果为0.00449g/kg，山梨酸为0.00198g/kg，满足GB 2760-2024中苯甲酸的最大使用量0.8g/kg，山梨酸最大使用量0.2g/kg。某品牌黄酒苯甲酸计算结果为0.00185g/kg，满足GB/T 13662-2018中苯甲酸最大值0.05g/kg。

3.6 注意事项

在使用离心机前需要注意要将离心管等重。

4、总结

本篇采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置紫外检测器。实验结果显示，系统适应性测试苯甲酸、山梨酸和糖精钠峰型均良好，目标峰周围无杂峰，理论塔板数高，分离度均大于1.5，满足实验要求。苯甲酸、山梨酸和糖精钠曲线相关系数R值分别为0.9999、1.000、0.9999，均在0.9999以上。苯甲酸、山梨酸和糖精钠保留时间重复性RSD分别为0.086%、0.083%、0.1%。峰面积重复性RSD分别为0.438%、0.426%、0.408%，重复性好。苯甲酸、山梨酸和糖精钠检出限分别为0.012mg/L，0.011mg/L，0.026mg/L。以上各项数据结果均满足国标方法中对仪器的要求。