柱切换离子色谱法测定厄贝沙坦中的叠氮根离子推文

前言：

厄贝沙坦（irbesartan），适用于治疗原发性高血压，是一种新型血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂，具有良好的降压作用和极少的不良反应。目前，该药已列入《国家基本医疗保险药品目录》，市场应用普遍。厄贝沙坦为2-正丁基-3-[（2'-氰基联苯-4-基）甲基]-1，3-二氮杂螺[4，4]-壬-1-烯-4-酮（中间体）与叠氮化钠（NaN₃）经环加成制得，由合成工艺可知，产品中易引入叠氮根离子。叠氮化物，为剧毒物质，因此，对厄贝沙坦原料进行叠氮根离子的控制是十分必要的。

美国药典和欧洲药典均采用离子色谱法测定叠氮根离子，以100mmol/L的氢氧化钠为淋洗液，采用强保留离子色谱柱进行分离，叠氮根离子限度为不得过10 mg/L。本方法采用柱切换离子色谱法测定厄贝沙坦中的叠氮根离子，以90%甲醇为溶剂溶解样品后直接进样，预处理柱、富集柱和分析柱以适当的方式与六通阀连接，使之能并联、串联切换使用。预处理柱和富集柱作为前处理柱用于色谱柱前的样品处理，在去除样品基质的同时富集待测组分，又可保护分析柱，延长分析柱的寿命。该方法操作简便，并可在脂溶性药物的痕量离子测定中广泛应用。

关键词：厄贝沙坦；叠氮根；离子色谱；柱切换

1. 实验方法

1.1仪器配置

1.2实验材料及辅助设备

水中叠氮根标准溶液：1000mg/L；

厄贝沙坦原药；

甲醇，色谱纯；

乙腈，色谱纯；

系统适应性溶液：用90%甲醇溶液配制成Br^-、N₃^-、NO₃^-浓度均为0.2μg/mL的溶液，考察系统适应性；

标准溶液：用90%甲醇溶液稀释叠氮根标准溶液制成叠氮根离子浓度为0.2μg/mL的溶液，备用；

样品溶液：取厄贝沙坦适量，加90%甲醇溶解并稀释制成每1mL中约含厄贝沙坦20mg的溶液，备用；

一次性注射器（2mL）；

水系针式过滤器（0.22μm）；

万分之一电子天平；

实验用水为皖仪科技超纯水净化器制备，电导率为18.25MΩ·cm（25℃）。

1.3测试条件

1.4样品前处理

取厄贝沙坦适量，加90%甲醇溶解并稀释制成每1mL中约含厄贝沙坦20mg的溶液，备用。

2.结果与讨论

2.1系统适应性

取系统适应性样液，按照1.3工作测试条件得到系统适应性谱图如图1，测试结果见表1。

2.2线性测试

依次移取0.04mg/L、0.10mg/L、0.16mg/L、0.20mg/L、0.24mg/L、0.40mg/L的系列标准工作曲线，按照1.2工作测试条件得到标准曲线谱图多点重叠图如图2，线性方程见表2，叠氮根离子在该色谱条件下线性相关系数R=0.999以上，线性良好。

2.2 样品测试

2.2.1 样品含量测试

在1.3的工作测试条件下，对1.4的前处理后样品进行检测。样品空白谱图如图4所示，样品图谱如图5所示，样品图谱中的目标叠氮根未检出，最终得到样品中叠氮根离子的含量如表3所示。（n.d.表示未检出）

2.2.2标准品重复性测试

在1.3的工作测试条件下，对标准品进行重复性测试。得到谱图多点重叠图如图6，检测结果见表4，可见N₃^-重复性试验峰面积RSD为0.416%，保留时间RSD为0.036%。检测可靠，重复性良好。

2.2.3检出限和定量限测试

取标准品溶液，逐级定量稀释，进样并记录色谱图，定量限（LOQ）以信噪比为10:1的浓度计算，检出限（LOD）以信噪比为3:1的浓度计算。结果得叠氮根离子的定量限为3.31μg/L，检出限分别为0.99μg/L。图7为对应离子色谱图。最终结果如表5所示。

2.2.4样品加标测试

取厄贝沙坦样品，精密加入标准品溶液，定容至100mL容量瓶，添加水平为50.0μg/L、100.0μg/L、150.0μg/L，按1.4的方法继续前处理样品。在1.3工作测试条件下，对前处理后的样品进行检测分析。样品加标谱图如图8所示，按如下公式计算回收率，结果见表6。可见叠氮根离子回收率范围92.0~96.0%，结果良好。

3．结论

建立了一种离子色谱测定厄贝沙坦中叠氮根离子的方法。取标准品溶液连续进样6针，保留时间的RSD为0.036%，峰面积的RSD为0.416%，表明本方法进样精密度良好。线性良好，相关系数0.99956。按叠氮根离子限度的50%、100%、150%浓度进行回收率试验，回收率在92.0%~96.0%之间，回收率良好。叠氮根离子的定量限和最低检出限分别为3.31μg/L、0.99μg/L。

采用皖仪IC6600离子色谱仪搭配柱切换组件，建立离子色谱法测定厄贝沙坦中的叠氮根离子。样品通过前处理，然后经离子色谱柱分离，采用外标法定量，能够对厄贝沙坦中的叠氮根离子进行定性、定量分析，该方法简单易行，重复性好，灵敏度、准确度均能达到要求，可采用此方法进行厄贝沙坦中的叠氮根离子的含量测定。