离子色谱的使用与操作方法及维护保养与注意事项！

百欧博伟生物：离子色谱在检测阴阳离子方面成绩显著，因此许多实验室都配有离子色谱仪。为了大家能更好地使用它，小编专门整理了这篇离子色谱使用、维护及保养手册，希望帮助你在使用离子色谱仪的过程中有所助益。

首先什么是离子色谱？

离子色谱 (Ion Chromatography)是高效液相色谱(HPLC)的一种，是分析阴离子和阳离子的一种液相色谱方法。

狭义而言, 离子色谱法是以低交换容量的离子交换树脂为固定相对离子性物质进行分离, 用电导检测器连续检测流出物电导变化的一种色谱方法。

《离子色谱原理与应用》中对离子色谱法的定义是：利用被测物质的离子性进行分离和检测的液相色谱法。

离子色谱仪的原理

分离的原理是基于离子交换树脂上可离解的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子之间进行的可逆交换和分析物溶质对交换剂亲和力的差别而被分离。适用于亲水性阴、阳离子的分离。例如几个阴离子的分离，样品溶液进样之后，首先与分析柱的离子交换位置之间直接进行离子交换（即被保留在柱上），如用NaOH作淋洗液分析样品中的F-、Cl-和SO42-，保留在柱上的阴离子即被淋洗液中的OH-基置换并从柱上被洗脱。

对树脂亲和力弱的分析物离子先于对树脂亲和力强的分析物离子依次被洗脱，这就是离子色谱分离过程，淋出液经过化学抑制器，将来自淋洗液的背景电导抑制到最小，这样当被分析物离开进入电导池时就有较大的可准确测量的电导信号。

开/关机操作

离子色谱仪分析过程由进样（样品环进样）、分离（离子交换柱分离）、抑制（抑制器）、检测系统和数据系统五部分组成。

基本操作步骤

1、开机前的准备：打开实验室空调，根据样品的检测条件和色谱柱的条件配置所需淋洗液和再生液。

2、开机：

a.依次打开打印机、计算机进入操作系统；

b.打开氮气钢瓶总阀，调节钢瓶减压阀分压表指针为0.2MPa左右，再调节色谱主机上的减压表指针为5psi左右，确认离子色谱仪与及计算机数据线连接正常，打开离子色谱主机电源；

c.点击开始、程序、Chromeleon、sever monitor、双击桌面上工作站程序、双击安装目录下离子色谱操作控制面板；

d.操作控制面板打开后选中connected使软件与离子色谱仪联动起来，打开泵头废液阀排除泵和管路里的气泡，关闭泵头废液阀，开泵启动仪器，查看基线，待基线稳定后方可进样分析。

3、样品分析：建立程序文件；建立方法文件；建立样品表文件；加样品到自动进样器或手动进样；启动样品表；若是手动进样，按系统提示逐个进样分析。

4、数据处理：建立标准曲线；打印标准曲线；打印待测样品分析报告。

5、关机：关闭泵，关闭操作软件；关闭离子色谱主机电源；关闭氮气钢瓶总阀并将减压表卸压；关闭计算机、显示器和打印机电源。

离子色谱仪维护注意事项

离子色谱仪维护主要就是几大部件的维护，以下将按照流路顺序为大家介绍下各部件的维护注意事项：

1、滤头：

流动相起始部位，长期置于超纯水中，保持湿润状态，但是水是容易变质的，所以要经常换水，以免生出藻类和菌类堵塞滤头，造成系统压力升高，或者会吸入泵头内造成单向阀的污染，引起压力不稳，流速不定。

2、恒流泵：

每天做完实验对泵头进行清洗和后冲洗是很重要的，泵头内比较重要的部件就是单向阀，宝石杆，高压密封圈，一般出问题的地方也是这几个地方，使用碱性试剂很容易结晶，容易划伤这些部位，所以要保证完整充分的清洗。如果长期不使用仪器，也要定期进行清洗工作。

3、进样阀：

进样阀如果污染了会很容易造成堵塞和一些莫名其妙的问题，所以每次做完实验是对进样阀进行一些清洗工作，避免残留和污染，清洗完后想办法盖上进样口，防止灰尘污染。

4、色谱柱：

色谱柱在淋洗液的环境中密封保存就可以了，尽量避免用水去冲洗，因为色谱柱在酸性或者碱性条件下更容易抑制细菌的生长，而且更接近于使用环境，如果纯水保存很容易变质，另外色谱柱最难承受有机物和重金属的干扰，进样品尽量避免此两种物质进入。如果长时间不使用色谱柱，也要定期使用淋洗液进行清洗，防止内部干燥和细菌生长。

5、抑制器：

抑制器最重要的是内部要保持湿润，所以如果长期不使用一定要定期进行冲洗，冲洗完毕后将几个与大气相同的端口封闭保存。另外如果没有液体经过抑制器时，不能开电流，否则内部的交换膜会被电解干裂，造成损坏。

6、电导检测器：

也是定期冲洗，如果你一段时间不使用仪器，你可能会看到电导值居高不下，就是因为抑制器内或者电导池内的水变质引起的，多冲洗一下就会降下来，但是也说明了维护不够，是定期通水维护为好。

维护保养注意事项

1、试剂用水需要到达18.2M，洗脱液必须经0.45um或更小的滤膜抽滤(必要时可用二层滤膜过滤)真空脱气后才可使用。滤膜为一次性，每次使用前需要先过滤高纯水以清洗干净。抑制器再生液可以不过滤脱气。

2、环境必须无腐蚀气体，通风良好。

3、样品一定要去除固体微粒后才能进样。如样品比较脏可以先用滤纸粗滤后再过0.45um的滤膜过滤，一定要得到澄清液后才经滤头进样。对有颜色的肮脏的样品要用做前处理后才可进样。

4、洗脱液试剂需要优级纯以上。

5、分析柱不可摔打碰撞。

6、分析柱上有箭头表示洗脱液流进和流出的方向，不可以接反。

7、安装分析柱时，为避免气泡产生请按下述顺序安装：拧开分析柱进口接头螺丝，装好配制的洗脱液，排气泡后启动IC泵，待有溶液从管接头流出后，把分析柱进口接头螺丝拧紧，待有溶液从分析柱出口流出时，不要急于拧上出口接头螺丝，让溶液冲洗分析柱5分钟左右，然后再接上分析柱出口接头螺丝。

8、必须在有保护柱的情况下做样。

9、不要把样品中的气泡注射入分析柱。

10、装标准的容量瓶不可用酸泡。

11、高压IC泵不可空转。

12、每天关机前要用淋洗脱液冲洗分析柱30分钟。

13、电脑中的电源管理和屏幕保护要关闭。

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