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浅析凝胶色谱净化系统的测定流程
2025年03月19日 10:54
来源：上海杜凯生物科技有限公司
凝胶色谱净化系统，特别是凝胶渗透色谱(GPC)系统，在现代分析化学、生物化学及环境监测等领域中扮演着至关重要的角色，利用多孔凝胶作为固定相，根据分子大小的差异对样品进行分离。大分子物质由于无法进入凝胶孔隙而先流出，小分子物质则进入孔隙并后流出，从而实现不同大小分子的有效分离。这种分离机制对于去除样品中的大分子杂质，如蛋白质、多糖等，以及富集目标小分子化合物，如药物活性成分、环境污染物等，具有重要意义。
凝胶色谱净化系统的测定步骤：
1.样品准备：将待测样品溶解在适量的溶剂中，使其浓度达到适合测定的范围。溶液中的固体颗粒应尽量去除，可通过过滤或离心操作来完成。
2.仪器检查：打开仪器电源，启动GPC系统。检查仪器各个部分的连接是否紧密，确保没有泄漏。检查流动相的质量和纯度，必要时进行更换。
3.设置参数：根据样品的特性和需要选择合适的洗脱缓冲液，并将其冷藏备用。设置流动相的流速和温度，一般情况下，流速根据实验需要选择，温度一般设置在室温下进行。
4.样品注入：使用适当的毛细管或注射器将样品注入到色谱柱中。
5.开始运行：开始运行GPC实验，记录运行开始的时间。设定好GPC柱的温度、流速和检测器的灵敏度等参数。打开检测器的电源，选择合适的检测波长或检测器类型。
6.数据记录：开始样品分离，记录分离过程中的响应信号，并保存数据。
7.数据处理：使用专用的GPC数据处理软件对得到的数据进行处理。根据响应信号与时间的关系曲线，计算出不同分子量的聚合物峰面积。将样品的峰面积与标准聚合物的峰面积进行比较，计算出待测样品的分子量分布。
8.结果输出：根据实验需要，可以生成相关的分子量分布曲线或分子量平均值等结果。
关键词：
凝胶渗透
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