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高速逆流色谱仪特点及其原理的技术探析
2026年09月14日 09:47
来源：上海同田生物技术股份有限公司
高速逆流色谱仪是一种无需使用固体固定相的液-液分配色谱分离设备，依靠特殊的流体动力学效应实现样品中不同组分的有效分离，在多个领域得到广泛应用。
设备全程采用纯液相分离体系，无硅胶、树脂等固体支撑载体，杜绝了传统色谱中样品不可逆吸附、氧化失活、变性分解的问题，尤其适用于热敏性、易氧化、高活性的天然产物与生物活性物质分离。常规样品回收率可达90%以上，残留于管路中的样品可通过反向洗脱、全溶剂冲洗等方式回收，大的降低了珍贵样品的损耗。
高速行星式运动产生的复合离心力场，让两相溶剂的混合传质更充分、分配平衡速度更快。同时设备分离容量大，半制备型机型可实现毫克至克级样品的单次处理，能够满足实验室分析、小规模制备到工业化中试的多级需求，解决了传统分析型色谱仅能微量检测、制备效率低的痛点。
设备不局限于单一溶剂体系，可根据目标组分的极性、溶解度等特性，灵活搭配各类互不相溶的两相溶剂系统，涵盖极性、中极性、弱极性等不同体系。同时洗脱方式灵活，可根据分离需求选择上相、下相作为流动相，适配绝大多数天然产物、有机合成产物、生物提取物的分离纯化，通用性强。
高速逆流色谱仪的核心分离逻辑基于液-液两相分配原理与行星式离心力场作用机制，无需固体固定相载体，依靠两种互不相溶、密度不同的溶剂体系实现样品组分的分离纯化，规避了传统色谱的载体吸附缺陷。目前主流设备为J型螺旋管行星式结构，是技术成熟、应用广泛的机型。
设备核心分离单元为缠绕式螺旋色谱管，工作时电机驱动螺旋管完成复合行星式运动：一方面绕仪器中心主轴高速公转，另一方面围绕自身转轴同步同向自转，持续产生强度与方向周期性变化的不对称复合离心力场。在该特殊力场作用下，预先配置的互不相溶两相溶剂实现稳定分层，其中一相溶剂被稳定保留在螺旋管内作为固定相，另一相溶剂由恒流泵持续泵入管路作为流动相，形成动态平衡的液-液分离体系。
当样品随流动相进入螺旋管分离体系后，不同组分依据自身理化性质差异，在固定相和流动相之间进行反复、高频的溶解、分配、萃取与传质过程。在常规工作转速下，两相溶剂的混合分配频率可达每秒十余次，大幅提升分离效率。由于样品中各组分的分配系数存在固有差异，其在两相溶剂中的停留时间、迁移速度各不相同，分配系数大的组分更易留存于固定相，迁移速度慢；分配系数小的组分随流动相快速洗脱，实现不同组分的精准分离。分离后的洗脱液经检测器实时采集信号，通过色谱图谱完成组分定性与定量分析，同时可实现目标组分的制备级收集。
关键词：
高速逆流色谱系统
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