一文读懂凝胶色谱仪:原理、系统组成与应用
2026年10月10日 16:44
来源:上海杜凯生物科技有限公司
凝胶色谱仪基于分子尺寸差异实现分离,是测定高分子分子量及其分布的核心设备。
一、分离原理
凝胶色谱又称体积排阻色谱,其固定相为多孔凝胶颗粒。当样品随流动相进入色谱柱时,分子尺寸大于凝胶孔径的组分无法进入孔道,只能沿颗粒间隙流动,路径最短,最先流出;尺寸较小的分子可进入部分孔道,路径延长,保留时间增加;尺寸最小的分子能进入全部孔道,路径最长,最后流出。由此,分子按尺寸由大到小依次洗脱,实现分离。整个过程不依赖化学吸附,条件温和,不易破坏样品结构。
二、系统组成
凝胶色谱仪主要由输液系统、进样系统、色谱柱、检测器和数据处理系统构成。输液泵提供稳定流动相流速;进样阀将样品定量送入柱内;色谱柱填充不同孔径的凝胶填料,是分离核心;检测器常用示差折光、紫外或粘度检测器,其中示差折光对无紫外吸收的高分子响应良好;数据处理系统记录并计算分子量分布。多检测器联用可同时获得分子量与支化信息。
三、应用领域
凝胶色谱广泛用于高分子材料分子量及分布的测定,是聚合物质量控制的关键手段。在生物医药中,用于蛋白质、多糖的纯化与分子量分析,也可检测聚集态。在食品、石油化工等领域,用于分析天然产物和树脂成分。其突出优势是分离条件温和、重复性好,但分辨能力有限,常需与其他色谱技术互补使用。
关键词:
凝胶色谱仪,凝胶色谱仪的工作原理
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