赛默飞食品中脂肪酸测定方案

脂肪酸

脂肪作为人体的三大供能营养素之一，对人体有许多重要的生理作用。油脂中 90% 以上是脂肪酸，而脂肪酸又分为饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸。多不饱和脂肪酸中含有的 n-6 和 n-3 脂肪酸属必需脂肪酸，是人体无法合成而必须从食物中获取的。脂肪酸成分是食品质量的重要指标，因为它提供了有关含脂肪食品营养价值的关键信息。食品中脂肪酸成分的测定通常使用有机溶剂从食物基质中萃取脂肪含量，然后对甘油三酯进行酸性水解或碱性水解，从而产生游离脂肪酸。通过与甲醇的酯化作用将这些游离酸转化为甲基酯类 (FAMEs)，以增加其挥发性，从而使其适合 GC 分析。根据食品中脂肪酸含量的不同，样品的衍生化过程不同，但都存在操作步骤多，耗时且成本高昂，容易出现错误和交叉污染的问题。

赛默飞最新的Trace 1600系列气相色谱仪可为用户提供全自动样品制备平台，同时采用超高效的FAME色谱柱和H2做载气可实现10分钟内高效分离37种脂肪酸。赛默飞智能即时连接分流/不分流进样口的Thermo Scientific™ HeSaver-H2Safer™ 可限制载气的总流速，从而消除使用氢气作为载气有关的任何安全风险。另外还可以在柱温箱中安装氢气传感器，进一步提高使用氢气的安全性。

赛默飞全新Trace1600系列气相色谱仪

一

自动样品处理平台

自动化样品制备可加快样品制备速度，提高通量，同时避免人为操作导致的误差和交叉污染。TriPlus RSH SMART 自动进样器提供先进的内置机器人，具有优秀的精度和重现性。可实现日常样品处理操作的完全自动化或自定义更复杂的样品制备工作流程。对于分析效率有更高要求的用户，一套TriPlus RSH SMART制备平台可以为两套GC使用，将衍生化的样品注入到两套GC，从而提供一倍工作效率。按照 ISO 12966-2“快速”法（单一酯基转移步骤），通过设置好的制备循环，制备平台可在 8 个工时内可制备多达 48 个样品。当需要根据 AOAC 996.01 方法进行酸催化甲基化时，可在大约 4.30 个工时内制备24 个样品。

二

TRACE 1610 GC 参数

进样口：温度230度，分流比300:1，隔垫吹扫5mL/min

载气：氢气，0.2mL/min

程序升温：40度(保持1min)，80 ºC/min至150度，11 ºC/min至240度(保持1min)

色谱柱：TRACE TR-FAME (10m, 0.10mm, 0.20μm)

FID：温度280度；空气350mL/min；氢气35mL/min；尾吹气40mL/min

01

标样色谱分离效果

37种脂肪酸甲酯标准色谱图见图1。采用的 TRACE TR-FAME 毛细管柱长度仅为 10 m，可在10分钟内实现目标化合物的高效分离。其中关键物质对（C21:0、C20:2 和 C20:3、C22:1）的分离度 (Rs) 计算值 ≥ 1.0（应用 USP 公式）。此外，目标分析物达到高斯峰形，平均计算不对称因子 (As) 为 1.0。

图1 37种脂肪酸甲酯色谱图（标准品用正己烷稀释，稀释比1:10）（点击查看大图）

02

日内和日间萃取重复性

使用自动制备平台，在测试期间，日内和日间的整体绝对峰面积 RSD < 9%，相对峰面积 RSD < 3.3%。此外，TRACE TR-FAME 色谱柱的专业优化设计确保了稳定的色谱性能，整个测试期间的平均 RT偏差和 As 分别为 0.005 分钟和 1.0，结果见图2。

图2 六个工作日内日内和日间萃取重复性的重叠色谱图（点击查看大图）

03

花生油样品分析

植物油样品分析：使用该平台分析了花生油样品，色谱图见图3。

图3 花生油脂肪酸成分的色谱图。浅蓝色色谱图采用AOAC 996.01衍生化法，黄色色谱图采用ISO 12966-2“快速法”。（点击查看大图）

总 结

赛默飞Trace 1600系列气相色谱仪以其出色的灵活性和稳定性，可以在一台GC上同时搭载多个应用方法，并可以随时更换不同类型进样口、检测器，满足实验室多任务分析需求，为用户提高效率、节约成本，提供切实可行的方案。赛默飞智能即时连接分流/不分流进样口的Thermo Scientific™ HeSaver-H2Safer™ 可限制载气的总流速，从而消除使用氢气作为载气有关的任何安全风险。另外还可以在柱温箱中安装氢气传感器，进一步提高使用氢气的安全性。快速高效的气相分离方法结合全自动样品制备平台可为用户提供了高通量，高效率的解决方案。