皖仪科技液相色谱对碳酸饮料中阿斯巴甜的检测

皖仪科技液相色谱对碳酸饮料中阿斯巴甜的检测

前言

阿斯巴甜作为食品添加剂（甜味剂），其甜度约为蔗糖的100～200倍，可适量用于碳酸饮料、浓缩果汁、糖果、乳制品、冷冻饮品、调味品等食品。2023年7月，世界卫生组织（WHO）下属的国际癌症研究机构（IARC）依据对人类致癌性的“有限证据”，将阿斯巴甜归为可能对人类致癌物质（2B类），引发了消费者对阿斯巴甜安全性的广泛关注。阿斯巴甜的副作用仍存在一定的争议，对食品中阿斯巴甜的含量检测更显得尤为重要。

本篇文章参考了《食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定》GB 5009.263-2016 高效液相色谱法色谱条件，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置紫外检测器进行检测。实验结果显示，阿斯巴甜的线性良好，R值在0.999以上，阿斯巴甜标准品色谱峰正常，理论塔板数为8500以上。阿斯巴甜标准品重复进样6次，保留时间RSD值为0.104%，峰面积RSD值为0.454%，重复性较好。以碳酸饮料作为测试样品，可得碳酸饮料样品中阿斯巴甜浓度为23.639 μg/mL，阿斯巴甜的使用量为0.118 g/kg，检测结果正常。说明了该方法配备皖仪科技LC3200系列仪器满足对碳酸饮料中阿斯巴甜的检测需求。

关键词：阿斯巴甜；高效液相色谱法；紫外检测器；碳酸饮料。

1 实验方法

1.1仪器配置

皖仪科技LC3200系列高效液相色谱仪

表1 高效液相色谱系统配置清单

1.2 实验材料及辅助设备

乙腈：色谱纯；

阿斯巴甜标准品：CAS 22839-47-0，纯度大于99%；

分析天平；

水浴锅；

超声波清洗机；

涡旋混合器；

离心机；

0.45μm水系滤膜。

1.3 测试条件

流动相：乙腈：水=20：80；

色谱柱：C18色谱柱，4.6×250mm，5μm；

柱温：30℃；

流速：0.8 mL/min；

进样量：20μL；

检测波长：200nm。

1.4 溶液配制

1.4.1 阿斯巴甜标准储备液（0.5mg/mL）

 称取0.0252g阿斯巴甜标准品 ，用水溶解并转移至50mL容量瓶中并定容至刻度，置于4℃冰箱中保存，有效期为90天。

1.4.2 阿斯巴甜标曲实验工作液

将阿斯巴甜标准储备液（0.5mg/mL）用水逐级稀释成混合标准系列，阿斯巴甜标准工作液的浓度分别为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、10.0μg/mL、5.0μg/mL的标准使用溶液系列。置于4℃冰箱中保存，有效期为30天。

2 结果与讨论

2.1系统适用性

图1 阿斯巴甜标准品色谱图

表2阿斯巴甜标准品色谱参数

说明：由上述谱图可见，阿斯巴甜标准品色谱峰正常，保留时间为6.916 min，理论塔板数为8500以上。

2.2标准曲线

图2 阿斯巴甜标准曲线及相关系数

说明：本次测试的阿斯巴甜标准工作曲线浓度为100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL、10.0μg/mL、5.0μg/mL。阿斯巴甜标准曲线线性范围较好，线性相关系数＞0.999，满足实验分析需求。

2.3 重复性

图3 阿斯巴甜标准品重复性实验色谱图

表3阿斯巴甜标准品色谱参数

说明：阿斯巴甜标准品重复进样6次，保留时间RSD值为0.104%，峰面积RSD值为0.454%，重复性较好。

2.4 样品测试

选择碳酸饮料作为基质，称取样品4.9982g，置于50mL烧杯中，在50℃水浴上除去二氧化碳，然后将试样全部转入25mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，4000 r/min离心5min，上清液经0.45μm水系滤膜过滤，进样量20μL，供高效液相色谱仪测定。

图4 碳酸饮料样品溶液色谱图

表4 碳酸饮料样品溶液色谱参数

表5 碳酸饮料样品阿斯巴甜使用量

*指标要求源于《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》GB2760-2014

说明：通过计算得碳酸饮料中阿斯巴甜浓度为23.639 μg/mL，碳酸饮料样品阿斯巴甜使用量为0.118 g/kg，满足《食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》GB2760-2014规定的碳酸饮料中阿斯巴甜最大使用量要求，检测结果正常。

2.5 注意事项

阿斯巴甜标准贮备液及相关工作液均需在4℃条件下保存，实验前要注意溶液的有效期。

3 结论

本篇文章参考了《食品安全国家标准 食品中阿斯巴甜和阿力甜的测定》GB 5009.263-2016 高效液相色谱法色谱条件，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置紫外检测器进行检测。实验结果显示，阿斯巴甜的线性良好，R值在0.999以上，阿斯巴甜标准品色谱峰正常，理论塔板数为8500以上。阿斯巴甜标准品重复进样6次，保留时间RSD值为0.104%，峰面积RSD值为0.454%，重复性较好。以碳酸饮料作为测试样品，可得碳酸饮料样品中阿斯巴甜浓度为23.639 μg/mL，阿斯巴甜的使用量为0.118 g/kg，检测结果正常。说明了该方法配备皖仪科技LC3200系列仪器满足碳酸饮料中阿斯巴甜的检测需求。