液相色谱对复方金银花颗粒及药材中灰毡毛忍冬皂苷乙的检测

液相色谱对复方金银花颗粒及药材中灰毡毛忍冬皂苷乙的检测

前言

金银花和山银花同属忍冬科植物，过去二者都作为金银花入药。近些年开始将金银花和山银花区别使用，两者在药材产地、性状及归属、化学成分等方面都存在较大差异。在产地上，金银花主产于北方，产地相对单一；山银花主产于南方，产地分布广泛。在外观性状上，金银花呈棒状，上粗下细，山银花则多为长条形，略弯曲，上下粗细相差不大。两者在化学成分上差别最为明显，金银花黄酮类成分含量较高，而山银花皂苷类成分含量较高。 2005 年版《中国药典》将金银花、山银花分列，主要考虑金银花大量作为中药注射剂的原料，而山银花中皂苷含量较高，一般皂苷具有溶血作用，如果将山银花与金银花混用，存在着潜在的安全风险。而能明显区别两者的是山银花的特有成分“灰毡毛忍冬皂苷乙”。目前常用的掺杂检测方法是使用薄层色谱法进行初筛，高效液相色谱法补充验证，此方法准确度较高，是金银花和山银花的有效鉴别手段。

本篇文章参考了中国食品药品检定研究院发布的《复方金银花颗粒中灰毡毛忍冬皂苷乙检查法》中高效液相色谱法色谱条件，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置蒸发光散射检测器进行检测。实验结果显示，理论板数按灰毡毛忍冬皂苷乙峰计算不低于 4000，满足系统适用性试验要求。在金银花颗粒及药材的样品色谱中未出现与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品色谱峰保留时间相应的色谱峰。说明了该方法配备皖仪科技LC3200系列高效液相色谱仪搭配蒸发光散射检测器满足对金银花颗粒及药材中灰毡毛忍冬皂苷乙的检测需求。

关键词：金银花颗粒及药材；高效液相色谱法；蒸发光散射检测器；灰毡毛忍冬皂苷乙。

1实验方法

1.1  仪器配置

表1高效液相色谱系统配置清单

1.2 实验材料及辅助设备

乙腈：色谱纯；

甲醇：色谱纯；

灰毡毛忍冬皂苷乙对照品;

金银花颗粒样品；

金银花药材；

分析天平；

研钵；

微孔滤膜：0.45μm；

超声波清洗机；

涡旋混合器。

1.3 测试条件

表2 高效液相色谱条件

1.4 溶液配制

1.4.1灰毡毛忍冬皂苷乙对照品溶液

取灰毡毛忍冬皂苷乙对照品适量，精密称定，加75%甲醇制成每lml含0.16mg的溶液，即得。

1.4.2 金银花颗粒供试品溶液的制备

取本品5袋金银花颗粒中的内容物，研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%的甲醇25ml，称定重量，摇匀，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

1.4.3 金银花药材供试品溶液的制备

取本品金银花药材，切碎研细，取10g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%的甲醇25ml，称定重量，摇匀，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2    结果与讨论

2.1系统适用性

 图1 灰毡毛忍冬皂苷乙标准品色谱图及色谱参数

说明：由上述谱图可见，理论板数按灰毡毛忍冬皂苷乙峰计算不低于 4000，满足系统适用性试验要求。

2.2 样品测试

分别精密金银花颗粒供试品溶液和金银花药材供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定。

图2  金银花颗粒及金银花药材与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品溶液重叠色谱图

说明：在金银花颗粒及药材的供试品溶液色谱中未出现与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品色谱峰保留时间相应的色谱峰。说明了该方法配备皖仪科技LC3200系列高效液相色谱仪搭配蒸发光散射检测器满足对金银花颗粒及药材中灰毡毛忍冬皂苷乙的检测需求。

2.3 注意事项

1. 标准品需在-20℃冰箱中保存；

2.在制备相关溶液时需要注意佩戴好实验室防护用品。

3 结论

本篇文章参考了中国食品药品检定研究院发布的《复方金银花颗粒中灰毡毛忍冬皂苷乙检查法》中高效液相色谱法色谱条件，采用皖仪科技高效液相色谱仪LC3200系列配置蒸发光散射检测器进行检测。实验结果显示，理论板数按灰毡毛忍冬皂苷乙峰计算不低于 4000，满足系统适用性试验要求。在金银花颗粒及药材的样品色谱中未出现与灰毡毛忍冬皂苷乙对照品色谱峰保留时间相应的色谱峰。说明了该方法配备皖仪科技LC3200系列高效液相色谱仪搭配蒸发光散射检测器满足对金银花颗粒及药材中灰毡毛忍冬皂苷乙的检测需求。