皖仪科技液相色谱LC3400对白酒中核苷类物质的检测

前言：

白酒是世界六大蒸馏酒之一，是以粮谷为主要原料，以大曲、小曲、麸曲、酵母等作为发酵剂，经蒸煮、发酵、蒸馏、勾调等多道工艺酿造而成。白酒的酿造需经历多种微生物混合发酵，微生物代谢会产生各种功能成分，如γ-氨基丁酸和核苷类物质等。其中，核苷类物质具有增强免疫、抗氧化、抗癌等生物活性，具有一定的保健作用。腺苷能显著提高细胞活力，在机体的中枢神经系统、心血管系统和凝血系统中发挥重要作用。尿苷具有促进睡眠和抗癫痫的作用，改善记忆功能。

本篇文章采用了皖仪科技高效液相色谱仪LC3400系列配置紫外检测器对白酒中核苷类物质含量进行检测。系统适用性实验结果显示，尿苷和腺苷色谱峰的理论塔板数均在7000以上。核苷类混合标准溶液重复进样6次，尿苷保留时间RSD值为0.0537%，峰面积RSD值为0.3859%。腺苷保留时间RSD值为0.2240%，峰面积RSD值为0.3866%。重复性较好。尿苷和腺苷的线性良好，线性相关系数均＞0.999，尿苷的检出限为0.67 μg/L，定量限为2.23 μg/L；腺苷的检出限为15.63 μg/L，定量限为52.09 μg/L。以某品牌白酒作为测试样品，该品牌白酒未检测出尿苷和腺苷，检测结果正常。说明了该方法配备皖仪科技LC3400系列仪器满足对白酒中核苷类物质含量的检测需求。

关键词：尿苷；腺苷；高效液相色谱法；紫外检测器；白酒。

1. 实验方法

1.1仪器配置

1.2实验材料及辅助设备

甲醇：色谱纯；

尿苷标准品；

腺苷标准品；

分析天平；

超声波清洗机；

涡旋混合器；

0.22μm水系滤膜。

1.3测试条件

1.4溶液配制

1.4.1核苷类物质标曲实验工作液

精密称取尿苷标准品1.00 mg和腺苷标准品10.00 mg置于同一 10 mL容量瓶中，用10%甲醇水溶解并定容，可得尿苷浓度为100μg/mL和腺苷浓度为 1000μg/mL的混合标准母液。再用10%甲醇溶液倍比稀释成混合标准系列，可得，核苷类混合标准工作溶液中尿苷浓度分别为100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL、1 μg/mL、

0.5 μg/mL；腺苷浓度分别为1000 μg/mL、500 μg/mL、250 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL。

2.结果与讨论

2.1系统适用性

说明：由上述谱图可见，尿苷色谱峰的保留时间为4.953 min，腺苷色谱峰的保留时间为17.245 min，理论塔板数均在7000以上。 

2.2标准曲线

说明：本次测试的核苷类混合标准工作溶液中尿苷浓度分别为100 μg/mL、50 μg/mL、25 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL、2 μg/mL、1 μg/mL、0.5 μg/mL；腺苷浓度分别为1000 μg/mL、500 μg/mL、250 μg/mL、100 μg/mL、50 μg/mL、20 μg/mL、10 μg/mL、5 μg/mL。尿苷和腺苷的标准曲线线性范围较好，线性相关系数均＞0.999，满足实验分析需求。

2.3 重复性

说明：核苷类混合标准溶液（尿苷25 μg/mL，腺苷250μg/mL）重复进样6次，尿苷保留时间RSD值为0.0537%，峰面积RSD值为0.3859%。腺苷保留时间RSD值为0.2240%，峰面积RSD值为0.3866%。重复性较好。

2.4 检出限

说明：以信噪比（S/N）为3确定检出限（LOD），尿苷检出限为0.67 μg/L，腺苷检出限为15.63 μg/L。以信噪比（S/N）为10确定定量限（LOQ），尿苷定量限为2.23 μg/L，腺苷定量限为52.09 μg/L。

2.5 样品测试

选择某品牌白酒作为基质，准确量取10 mL酒样经0.22μm水系滤膜过滤，进样量10 μL，供高效液相色谱仪测定。

说明：该品牌白酒未检测出尿苷和腺苷，检测结果正常。

2.6 注意事项

（1）在制备相关溶液时需要注意佩戴好实验室防护用品。

（2）相关溶液配制好后置于2-8℃保存。

3．结论

本篇文章采用了皖仪科技高效液相色谱仪LC3400系列配置紫外检测器对白酒中核苷类物质含量进行检测。系统适用性实验结果显示，尿苷和腺苷色谱峰的理论塔板数均在7000以上。核苷类混合标准溶液重复进样6次，尿苷保留时间RSD值为0.0537%，峰面积RSD值为0.3859%。腺苷保留时间RSD值为0.2240%，峰面积RSD值为0.3866%。重复性较好。尿苷和腺苷的线性良好，线性相关系数均＞0.999，尿苷的检出限为0.67 μg/L，定量限为2.23 μg/L；腺苷的检出限为15.63 μg/L，定量限为52.09 μg/L。以某品牌白酒作为测试样品，该品牌白酒未检测出尿苷和腺苷，检测结果正常。说明了该方法配备皖仪科技LC3400系列仪器满足对白酒中核苷类物质含量的检测需求。