采用超高效液相色谱快速分析化妆品用原料月桂 酰甘氨酸

摘要本文采用配备 Agilent 1290 Infinity II ELSD 的 Agilent 1260 Infinity II 超高效液相色谱系统，建立了一种针对化妆品用原料月桂酰甘氨酸的质量控制分析方法，并比较了在不同校准方式下所得到的实际样品检测结果之间的差异。结果表明，基于月桂酰甘氨酸标准溶液进行定量，所开发的方法在线性、灵敏度和精密度等方面均满足方法学要求；且三种实际样品的色谱图比较结果显示，月桂酰甘氨酸未受到干扰，表明该方法具有良好的专属性。

前言在化妆品中，具有面部清洁作用的洁面乳是一大类产品。洁面乳中起清洁作用的一般是表面活性剂，其包括阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子型表面活性剂和两性离子表面活性剂。在这些表面活性剂中，作为阴离子表面活性剂的氨基酸类表面活性剂以其温和、低毒、生物相容性好、发泡力强、环境友好等优点而得到广泛应用。氨基酸类表面活性剂通常由氨基酸和脂肪酸合成，且常用氨基酸包括肌氨酸、甘氨酸、谷氨酸和丝氨酸等。目前最常见的一类氨基酸类表面活性剂是甘氨酸型表面活性剂，包括椰油酰甘氨酸和月桂酰甘氨酸等。对于此类表面活性剂的质量控制，目前见诸报道的方法主要有：采用 LC-UV 在 203 nm 下测定月桂酰谷氨酸含量的方法[1]；采用α-溴代苯乙酮化衍生化方法进行样品前处理，然后利用 LC-UV 在254 nm 下分析不同椰油基氨基酸类表面活性剂中不同链长的脂肪酸组成[2]。但对于应用日益广泛的月桂酰甘氨酸，暂未查到相关检测方法。因此，有必要建立相应的质量控制方法来保证月桂酰甘氨酸从原料到成品的质量，从而确保化妆品使用的安全性和有效性。其中面临的挑战在于，从化学结构来看，月桂酰甘氨酸与文献报道的月桂酰谷氨酸一样，缺乏强紫外吸收基团。如果基于末端吸收，使用如文献[1] 所报道的方法进行分析时，可能存在色谱基线波动、测定稳定性差等问题。对于此类低紫外吸收或者无紫外吸收的物质，利用具有通用性响应的蒸发光散射检测器(ELSD) 进行检测，一般能够获得较好的灵敏度和基线，确保检测结果的准确性。

本文采用配备 Agilent 1290 Infinity II ELSD 的 Agilent 1260 InfinityII 超高效液相色谱系统，建立了一种针对月桂酰甘氨酸的质量控制分析方法，取得了比较理想的结果。

实验部分试剂和样品乙腈为色谱级，购自安谱公司；甲酸为色谱级，购自 Sigma 公司；实验用水为 Millipore Milli-Q 超纯水系统现制备的高纯去离子水；月桂酰甘氨酸标准品以及月桂酰谷氨酸钾样品 1、样品 2 和样品 3 由用户提供。

仪器和设备采用 Agilent 1260 Infinity II 液相色谱系统，配备如下安捷伦组件：Agilent 1260 Infinity II 四元泵（部件号 G7104C）、Agilent1260 Infinity II 自动进样器（部件号 G7129C）、Agilent 1260Infinity II 柱温箱（部件号 G7116A）和 Agilent 1290 Infinity IIELSD（部件号 G7102A）。标准溶液制备标准储备液：称取适量月桂酰甘氨酸标准品，加入乙腈:水 = 60:40的混合溶液，超声处理 10 min，使其溶解，制得每 1 mL 含 1 mg的溶液，摇匀后待用。标准工作液：精密吸取上述标准储备液适量，加乙腈:水 = 60:40的混合溶液稀释成 0.05 mg/mL、0.1 mg/mL、0.25 mg/mL、0.5 mg/mL 和 1 mg/mL 的溶液，摇匀后待用。

样品前处理分别称取月桂酰甘氨酸钾样品 1、样品 2 和样品 3 各 10 mg，置于 10 mL 量瓶中，向其中加入乙腈:水 = 60:40 的混合溶液，超声处理 10 min，使其溶解，摇匀，分别得到样品 1、样品 2 和样品3 溶液，待进样分析。

结果与讨论线性关系取各浓度标准工作液进样至液相色谱系统，在上述色谱条件下进行分析，所得色谱图如图 1 所示。图 1 为各标准工作液重叠图，月桂酰甘氨酸的响应与浓度成正相关。根据蒸发光散射检测器的原理，一般采用双对数方式进行校准，即，对峰面积与浓度分别取对数后进行线性回归分析。通过这种方式得到的校准曲线如图 2 所示，且线性回归方程为log(y) = 1.2536log(x) + 3.9578（其中：y 代表峰面积；x 代表浓度），相关系数 r = 0.99963。结果显示，采用传统的双对数方式，月桂酰甘氨酸可以获得良好的线性关系。由于 Agilent 1290 Infinity II ELSD 是一种采用全新双 PMT 设计的通用型检测器，具有较宽的动态范围（一般可以达到 103 次方），在低浓度和高浓度下均具有较好的响应一致性。因此，本方法还尝试对峰面积与浓度进行直接线性回归分析。通过直接线性校准所得到的校准曲线如图 3 所示，且线性回归方程为y = 8983.5787x – 424.0423，相关系数为 r = 0.99890。结果显示，由于1290 Infinity II ELSD 的创新设计，月桂酰甘氨酸采用直接线性校准，也可以获得良好的线性关系。