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国产凝胶渗透色谱的相关知识普及，你一定要知道
2025年03月11日 06:06
来源：上海杜凯生物科技有限公司
国产凝胶渗透色谱利用高分子溶液通过填充有微孔凝胶的柱子进行分离，依据分子大小进行分离。在柱内，不同大小的高分子分子会以不同程度渗透到填料的微孔中。体积大于凝胶空隙的分子会被排阻，直接流出柱子，而小分子则可以渗入凝胶孔隙中，后流出柱子。中等大小的分子介于两者之间。通过测量溶质和溶剂之间的折射率差异、紫外吸收、光散射或粘度等参数，得出分子的相关信息。
广泛应用于聚合物、生物大分子和其他高分子化合物的分析和表征。它可以用来确定聚合物的平均分子量、分子量分布以及聚合度等参数，从而评估聚合物的质量和性能。此外，还可以用于监测聚合反应的进程和控制聚合物的合成过程。
国产凝胶渗透色谱(GPC)的测定步骤：
1.样品准备：
-选择合适的溶剂：根据样品的性质选择能够溶解样品的溶剂，且该溶剂应与凝胶色谱柱兼容。例如，对于许多有机聚合物，常用的溶剂有四氢呋喃、甲苯、二甲基甲酰胺等；对于水溶性聚合物，则可选用纯水或水溶液作为溶剂。
-制备样品溶液：将样品溶解在选定的溶剂中，制成一定浓度的溶液。一般来说，样品浓度要适中，过高的浓度可能导致色谱峰变宽甚至出现平头峰，影响分离效果；过低的浓度则会降低检测的灵敏度。通常聚合物样品的浓度在0.1%-1%之间较为合适。
-过滤样品溶液：为了防止样品中的杂质堵塞色谱柱，需要使用滤膜对样品溶液进行过滤。对于有机相样品，一般使用0.45μm的滤膜；对于水相样品，使用0.22μm的滤膜。
2.仪器准备：
-开机预热：打开凝胶渗透色谱仪的电源开关，让仪器预热一段时间，一般需要30分钟到1小时左右，使仪器达到稳定的工作状态。同时，确保仪器的各个部件连接正常，如泵、进样器、色谱柱、检测器等。
-检查流动相：检查流动相是否充足，是否需要更换或补充。如果使用新的流动相，需要先对其进行脱气处理，以去除其中的空气，防止空气进入色谱柱影响分离效果。脱气的方法可以采用超声脱气、真空脱气或氦气鼓泡等。
-设置仪器参数：根据样品的特性和分析要求，设置合适的仪器参数，如流速、柱温、进样量等。流速一般控制在0.5-1.0mL/min之间，柱温通常为室温到150℃之间，进样量一般在10-100μL之间。
3.上机测试：
-清洗系统：先用流动相冲洗整个系统，将系统中可能存在的杂质冲洗干净，直到基线平稳为止。这一步通常需要10-30分钟左右。
-校准仪器：使用已知分子量的标准物质对仪器进行校准，建立分子量与保留时间之间的校正曲线。常用的标准物质有聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等。将标准物质配制成不同浓度的溶液，分别注入色谱仪，记录其保留时间和峰面积，然后通过软件拟合得到校正曲线。
-进样分析：将准备好的样品溶液通过进样器注入色谱仪，开始进行分离分析。样品在色谱柱中会根据分子大小进行分离，分子量大的先流出，分子量小的后流出，经过检测器时会产生相应的信号，从而得到色谱图。
4.数据分析：
-分子量计算：根据校正曲线和样品的保留时间，计算出样品的分子量及其分布。常见的分子量有数均分子量、重均分子量、粘均分子量等。通过对分子量分布的分析，可以了解样品中分子的大小分布情况，以及是否存在高分子量或低分子量的组分。
-数据整理与报告：将分析得到的数据进行整理，绘制出分子量分布曲线，并撰写分析报告。报告中应包括样品的基本信息、实验条件、分析结果等内容。
关键词：
凝胶渗透,国产凝胶渗透色谱
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