赛默飞液相色谱仪操作规程详解

2025年04月14日 01:08 来源：上海分析仪器销售中心第一营业部

　　赛默飞液相色谱仪作为高效液相色谱（HPLC）技术的核心设备，其操作规范性直接影响分析结果的准确性和仪器使用寿命。以下从实验准备、仪器操作、数据处理及维护保养四个维度，系统阐述赛默飞液相色谱仪的标准操作流程。

　　一、实验准备阶段

　　1.流动相配制：选用色谱纯（LC）级溶剂，使用0.45μm微孔滤膜过滤后，超声脱气10-20分钟。例如，含缓冲盐的流动相需脱气5分钟，防止气泡影响泵送精度。

　　2.色谱柱预处理：根据分析目标选择填料类型（如C18、硅胶柱），用流动相以1.0mL/min流速平衡30-60分钟，期间需监测基线稳定性。

　　3.样品预处理：所有样品需过滤去除颗粒物，酸性样品可加入1%醋酸改善峰形，碱性样品则添加10-20mmol/L三乙胺。

　　二、仪器操作流程

　　1.开机自检：依次启动泵、进样器、柱温箱和检测器电源，等待1-2分钟至变色龙服务管理器激活。

　　2.管路排气：拧松泵单元快速清洗阀，设置A通道流速3.0mL/min冲洗2分钟，重复操作B、C通道，确保流动相连续无气泡。

　　3.方法设置：通过“创建”菜单设定仪器方法，设置流动相比例（如A:C=40:60）、流速（1.0mL/min）及检测波长（如230nm），保存至Chromeleon 7软件固定文件夹。

　　4.样品分析：将标准品和样品置于自动进样器固定位置，启动序列分析，记录保留时间和峰面积数据。

　　三、数据处理与关机

　　1.数据采集：利用软件自动积分功能处理色谱图，若出现拖尾峰或前沿峰，需调整流动相比例或更换色谱柱。

　　2.关机维护：分析结束后，先用甲醇:水=5:95冲洗色谱柱30分钟，再用100%甲醇冲洗30分钟。关闭软件后，从下至上依次关闭各单元电源，填写使用记录。

　　四、维护保养要点

　　1.日常维护：每日用稀硝酸溶液超声清洗过滤器，避免盐类结晶堵塞管路。

　　2.色谱柱保护：使用保护柱延长寿命，当柱压升高时，用异丙醇-二氯甲烷（1:1）冲洗反相柱，或用纯甲醇冲洗正相柱。

　　3.pH值控制：硅胶基质色谱柱的流动相pH值需保持在2.5-7.0之间，防止骨架溶解或键合相剥离。

　　通过严格执行上述规程，可确保赛默飞液相色谱仪在药物分析、环境监测等领域持续输出稳定可靠的数据，为科研工作提供坚实保障。

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