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戴安高效液相色谱仪标准化操作流程解析
2025年04月27日 09:51
来源：上海分析仪器销售中心第一营业部
戴安高效液相色谱仪（HPLC）作为分析化学领域核心设备，其操作流程的规范性直接影响实验结果的准确性。本文基于设备结构特性，结合实验室实践，系统梳理其标准化操作流程。
一、开机准备与参数设置：
开机前需检查环境条件（温度10-40℃，湿度10%-85%），确认电源电压稳定。启动仪器后，通过控制面板设置流动相比例、流速（如0.5-2.0 mL/min）及柱温（如30-40℃）。例如，分析药物成分时，采用等度洗脱模式，将甲醇-水（70:30）作为流动相，流速设为1.0 mL/min，可实现有效分离。检测器参数设置需匹配分析需求，如紫外检测器需选择254 nm波长，带宽设为1 nm。
二、样品前处理与进样：
样品需根据性质选择前处理方法：固体样品需用甲醇或乙腈溶解，液体样品需用0.45 μm滤膜过滤。进样前需检查进样器状态，自动进样器需确认洗针液（50%甲醇）充足，手动进样则需确保注射器无气泡。进样量需控制在色谱柱容量范围内（如4.6 mm×250 mm色谱柱建议进样量<20 μL）。例如，在环境水样分析中，通过固相萃取富集后，将样品稀释至100倍并过滤，确保进样量精确至10 μL。
三、运行分析与数据处理：
启动分析后，需等待基线稳定（通常需10-30分钟），期间可进行质控样测试。数据采集时，需监控压力变化（正常范围50-400 bar），若压力异常需立即停机检查。分析完成后，采用外标法或内标法进行定量，例如通过建立标准曲线（R2>0.995），可实现ng/mL级定量分析。某实验室在分析食品添加剂时，通过优化流动相梯度，将检测限降低至0.5 ng/mL。
四、关机与维护：
实验结束后，需用纯有机溶剂（如甲醇）冲洗色谱柱30分钟，再关闭检测器电源。长期停机时，需用80%甲醇水溶液保存色谱柱，并定期进行系统压力测试。日常维护包括每周更换清洗液、每月清洗进样针，以及每季度更换在线过滤器。例如，某实验室通过严格执行维护规程，将色谱柱使用寿命延长至12个月以上。
戴安高效液相色谱的操作需遵循“准备-运行-维护”闭环管理，通过精细化参数设置和标准化流程控制，可确保实验数据的可靠性和仪器运行的稳定性，为科研和质量控制提供坚实保障。
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